时间:09-16人气:10作者:萌妞优酸乳
PCR技术能够重复扩增目标DNA片段。每次循环包含变性、退火和延伸三个步骤,理论上可以产生2^n个目标分子,n代表循环次数。实际操作中,25-35个循环可获得足够产物。重复扩增在基因克隆、诊断检测和法医鉴定中广泛应用。实验室通过优化反应条件,确保扩增效率和特异性。
PCR重复扩增存在平台期现象。当反应达到一定循环数后,产物量不再增加,这是由于酶活性下降、引物耗尽或抑制剂积累所致。不同模板和引物组合的平台期出现时间各异,一般在20-30个循环后。研究人员会根据实验目的调整循环次数,避免过度扩增导致非特异性产物增加。
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