时间:09-17人气:23作者:唇齿相依
蛋白质浓度测定有几种可靠方法。Bradford法使用考马斯亮蓝染料,在595nm处检测颜色变化,操作简便快速。Lowry法结合了双缩脲反应和福林酚试剂,灵敏度较高,但反应时间较长。BCA法通过铜离子还原和显色反应测定,受干扰物质影响小。紫外分光光度法在280nm处直接测量芳香族氨基酸的吸光度,无需试剂,但样品纯度要求高。
不同方法适用不同实验条件。微量样品可选择NanoDrop直接测量,无需稀释。微量BCA法适合低浓度蛋白检测,灵敏度达μg级别。Bradford法兼容多种缓冲液,适合常规检测。SDS-PAGE电泳后通过考马斯亮蓝染色可半定量分析蛋白含量,适合复杂混合物。ELISA法特异性强,适合检测特定蛋白质,可达到ng级别灵敏度。
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