色谱柱要平衡多久才能用

色谱柱平衡时间因柱类型和流动相组成而异。常规反相柱需要平衡10-15个柱体积，正相柱约需5-8个柱体积。尺寸排阻柱平衡较快，3-5个柱体积即可。新柱首次使用前需平衡30分钟以上，使用过的柱重新平衡只需10-15分钟。平衡过程中基线波动应小于0.5毫吸收单位，流速稳定在设定值的±5%内才算合格。平衡不足会导致保留时间漂移，过度平衡则浪费时间和溶剂。

色谱柱平衡效果可通过进样标准品验证。平衡良好时，相邻3次进样的保留时间差不超过0.1分钟，峰面积相对标准偏差小于3%。实际操作中，梯度洗脱后平衡时间需延长20-30%，温度变化超过5℃时需重新平衡。高粘度流动相如乙腈-水比例低于20:80时，平衡时间应增加50%。柱压稳定在设定值±10个大气压内也是平衡完成的重要指标。