pcr是在哪几个温度之间循环

时间:09-17人气:23作者:不是本人

PCR技术主要在三个关键温度之间循环:变性温度约94-98℃,退火温度约50-65℃,延伸温度约72℃。每个温度点都有特定功能:高温使DNA双链解开,中低温让引物结合到模板上,适宜温度帮助DNA聚合酶合成新链。整个循环过程重复20-40次,每次循环都使目标DNA片段数量翻倍。

PCR温度循环的具体数值因实验目的而异。标准PCR变性温度设定在95℃,持续30秒;退火温度根据引物Tm值调整,一般比引物Tm值低5℃,时间30秒;延伸温度72℃,每分钟可合成1kb长度的DNA片段。热循环仪能精确控制这些温度转换,整个过程从开始到结束约需1-3小时,取决于循环次数和每个步骤的持续时间。

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