时间:09-17人气:25作者:南风草木香
生物实验中的缓冲液是维持pH值稳定的溶液,由弱酸及其共轭碱或弱碱及其共轭酸组成。实验室常用磷酸盐缓冲液(PBS)和Tris-HCl缓冲液,前者pH范围6.5-7.5,后者范围7.0-9.0。缓冲液能抵抗酸碱变化,保证酶活性、蛋白质结构和细胞功能正常。没有缓冲液,细胞培养会迅速死亡,DNA提取会降解,电泳条带会模糊。缓冲液浓度一般在10-1000毫摩尔之间,具体取决于实验需求。
缓冲液在生物实验中扮演"pH守护者"角色。高效液相色谱(HPLC)分析需要精确pH控制,缓冲液确保分离效果可靠。免疫印迹实验中,洗涤缓冲液(TBST)能减少非特异性结合,提高检测灵敏度。PCR反应体系中,缓冲液提供稳定环境,使DNA聚合酶在95℃变性、55℃退火、72℃延伸过程中保持活性。缓冲液还影响蛋白质结晶条件,合适的pH能促进晶体形成,帮助解析蛋白质三维结构。
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