pcr扩增从哪端开始复制

时间:09-17人气:18作者:雨夜孤云

PCR扩增从DNA片段的3'端开始复制。DNA聚合酶只能沿着5'到3'方向合成新链,因此引物必须结合到模板链的3'端。反应体系中加入的Taq酶会识别引物3'端,并开始添加脱氧核苷酸。整个过程需要经过20-40个循环,每个循环都会使目标DNA数量增加一倍。实验室中常用的PCR仪会精确控制温度变化,确保变性、退火和延伸三个步骤顺利进行。

PCR复制起始点由引物位置决定,而非DNA序列本身。设计引物时,研究人员会确保一对引物分别结合到目标序列的两端。正向引物结合到模板链的3'端,反向引物结合到互补链的3'端。这样,DNA聚合酶就能从两端向中间延伸,最终获得完整的双链DNA产物。实际操作中,引物长度通常为18-22个碱基,GC含量保持在40-60%之间,以确保特异性结合。

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