pcr是往哪一端延伸的

PCR反应从引物结合处开始，沿着模板链的5'到3'方向延伸。DNA聚合酶只能添加核苷酸到游离3'羟基端，导致新链合成方向固定。这个过程需要dNTPs提供原料，温度控制在72°C左右时效率最高。延伸时间根据目标片段长度调整，每1000个碱基约需1分钟。反应体系中Mg²⁺浓度对延伸效率至关重要，最佳浓度在1.5-2.5毫摩尔之间。

PCR延伸阶段引物决定了延伸起始点。正向引物引导互补链从5'向3'合成，反向引物则引导另一条链。两条引物之间的距离决定了最终产物长度。延伸过程中DNA聚合酶保持高保真度，错误率约为每10万个碱基1个。延伸速度受多种因素影响，包括模板纯度、引物设计质量和酶活性。反应缓冲液中的pH值维持在8.0-8.5之间时，聚合酶表现最佳。