琼脂糖凝胶电泳检测的原理

琼脂糖凝胶电泳利用琼脂糖凝胶作为介质，通过电场分离DNA、RNA或蛋白质。DNA分子在电场中带负电荷，会向正极移动。凝胶网络形成分子筛，较小的DNA片段移动速度快，较大的移动慢。电泳结束后，溴化乙锭等染料与核酸结合，在紫外灯下显示亮带。不同片段在凝胶中形成特定位置条带，可通过与已知分子量标准品比较确定DNA片段大小。这种方法广泛应用于基因克隆、PCR产物分析和DNA指纹鉴定等领域。

琼脂糖浓度决定凝胶孔径大小，影响分离效果。低浓度琼脂糖(0.7%)适合大片段DNA(5-20kb)分离，高浓度(2.0%)则适合小片段(100-500bp)。电泳缓冲液维持pH稳定并提供离子环境，常用TAE或TBE缓冲液。电压设置影响电泳速度，过高会导致条带变形，过低则延长实验时间。凝胶厚度一般控制在3-5mm，太薄散热好但易破，太厚则散热差。整个电泳过程需在低温环境下进行，防止DNA降解。