时间:09-18人气:24作者:噬天灭地
PCR过程中变性步骤所需温度最高,一般在94-98摄氏度之间。这个高温使DNA双链解开成单链,为后续的退火和延伸步骤做准备。实验室常用PCR仪能精确控制这个温度,确保DNA完全变性而不损伤。实际操作中,根据模板DNA的GC含量,温度可能需要调整。高GC含量的DNA需要更高温度才能完全解链。
延伸步骤的温度约为72摄氏度,低于变性温度但高于退火温度。这个温度最适合Taq DNA聚合酶的活性,酶在此温度下能高效合成新的DNA链。延伸时间取决于目标片段长度,每1000个碱基需要约1分钟。现代PCR仪能自动调节这三个温度,确保扩增反应高效进行。
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