pcr加样后可以放多久

PCR加样后应尽快进行扩增反应，理想情况下不超过30分钟。样本在室温放置过久会导致DNA降解，影响扩增效率。研究表明，样本放置1小时后，扩增成功率下降约25%。实验室实践中，加样到开始扩增的时间控制在15分钟内最佳。不同类型的样本稳定性不同，血液样本比组织样本更易降解，环境温度升高会加速这一过程。

PCR反应混合液配制后也有时效性。4℃保存条件下，混合液可稳定6小时；室温下稳定性降至2小时。多次冻融会显著降低Taq酶活性，影响扩增效果。荧光染料如SYBR Green在光照下会逐渐降解，导致信号减弱。实验室数据显示，反应混合液配制后4小时使用，扩增效率下降约15%，8小时后下降超过40%。