时间:09-15人气:10作者:禁止丶聊天
实时荧光PCR技术是一种分子生物学检测方法,通过荧光信号实时监测DNA扩增过程。这项技术利用特异性引物和荧光探针,在PCR反应过程中连续测量荧光强度变化,实现对目标核酸的定量分析。实验室常用TaqMan探针或SYBR Green染料作为荧光标记,仪器每15-30秒记录一次信号。实时荧光PCR检测速度快,整个实验过程仅需1-2小时,灵敏度可达10个拷贝,广泛应用于病原体检测、基因表达分析和食品安全监测等领域。
实时荧光PCR技术具有高特异性和高准确性特点。双链DNA结合染料如SYBR Green能结合所有双链DNA产物,而TaqMan探针则通过荧光共振能量转移原理实现特异性检测。该技术检测限低至10-100个拷贝,重复性好,变异系数小于5%。仪器自动化程度高,可同时处理96个或384个样本。实时荧光PCR在临床诊断中用于病毒载量监测,在科研领域用于基因表达差异分析,在环境监测中用于病原体快速筛查,展现了广泛的应用前景。
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