pcr至少循环几次能得到目的基因

PCR扩增目的基因最少需要25个循环。这个循环数足以将微量模板DNA扩增到可检测量。前10个循环产物呈指数增长，15-20循环进入平台期，25循环确保足够产物。实际操作中，30-35循环更常见，能提高成功率。短片段基因(200bp)25循环足够，长片段(1000bp以上)需35-40循环。不同DNA聚合酶效率不同，热稳定性好的酶可减少循环次数。

PCR循环次数受模板浓度影响。高浓度模板(10ng/μL)20-25循环即可，低浓度(0.1pg/μL)需要35-40循环。循环次数增加非特异性产物也会增多，25-30循环是理想平衡点。荧光定量PCR检测只需30-40循环，普通凝胶电泳检测需要35-45循环才能看到清晰条带。实验室标准程序设置35循环，兼顾效率和特异性。