时间:09-18人气:28作者:沙漠之领主
粘性末端不能直接和平末端结合。粘性末端具有互补的单链突出部分,能够通过碱基配对特异性连接,而平末端没有这种突出结构。分子生物学实验中,粘性末端连接需要DNA连接酶和ATP提供能量,形成磷酸二酯键。平末端连接效率较低,需要更高浓度的连接酶和更长的反应时间。实验室常用的T4 DNA连接酶能处理这两种末端,但效果不同。
平末端连接在基因克隆中应用广泛,特别是在构建载体时。粘性末端连接产物方向确定,平末端连接则随机。现代分子生物学技术可利用酶将粘性末端转化为平末端,或反之。PCR产物通常具有平末端,可与平末端载体直接连接。某些限制性内切酶如SmaI产生平末端,而EcoRI产生粘性末端,两者不能直接互补结合。
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