时间:09-15人气:16作者:糖醋污女
双缩脲试剂专门检测含有两个及以上肽键的化合物,多肽由氨基酸通过肽键连接而成,只要肽链长度足够,含有多个肽键就能与双缩脲反应呈现紫色。蛋白质是大分子多肽,双缩脲试剂检测牛血清白蛋白、溶菌酶等物质时呈现明显阳性反应,说明它能有效识别多肽结构。二肽因仅含一个肽键无法被检测,而三肽及以上多肽均可被识别,检测灵敏度随肽链长度增加而提高。
双缩脲试剂检测原理基于铜离子与肽键上的氮原子形成配位化合物,颜色深浅与肽键数量成正比。实验中,使用不同分子量的多肽标准品进行测试,结果显示分子量超过600道尔顿的多肽能产生稳定显色反应。实际应用中,多肽药物质量控制、蛋白质水解产物分析等领域广泛采用此方法,检测限约为10微克多肽。该反应不受氨基酸侧链影响,对酸性环境敏感,适合在中性pH条件下进行检测。
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