时间:09-16人气:28作者:情场浪子
新色谱柱活化时间因柱类型而异,常规反相柱需20-30分钟,流速0.5-1毫升每分钟。活化过程包括用甲醇平衡20分钟,再过渡到水相10分钟,最后用初始流动相平衡5分钟。尺寸排阻柱活化时间更长,约45-60分钟,流速控制在0.3-0.5毫升每分钟。离子交换柱活化时间约为30分钟,先用平衡缓冲液处理15分钟,再用样品缓冲液平衡15分钟。柱子体积越大,活化时间相应延长。
色谱柱活化效率直接影响分离效果,未充分活化的柱子会导致峰形变差、保留时间不稳定。实际操作中,监测基线稳定是判断活化完成的关键指标,基线波动需小于0.001毫吸收单位。环境温度变化会影响活化速度,25°C条件下比4°C快3-5分钟。新柱首次活化后,再次使用只需10-15分钟即可恢复性能,节省实验时间。
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