pcr在多少轮循环后能获得目的基因

时间:09-17人气:12作者:我主天下

PCR扩增目的基因一般需要25-35个循环。前10个循环产生指数增长,产物量增加明显。第15-20循环时,目的片段开始大量积累。第25循环后,扩增进入平台期,产物量增长缓慢。大多数标准PCR实验选择30个循环,这个数量能确保足够产物量,同时避免非特异性扩增。特殊情况下,低拷贝基因需要35-40循环,高拷贝基因则可减少至25循环。

PCR循环次数受多种因素影响。模板量少时需要增加循环数,但超过40循环会增加错误风险。引物设计质量决定效率,优质引物可在30循环内完成扩增。不同DNA聚合酶的耐受性不同,高保酶可支持更多循环。反应体系中抑制剂存在时,需适当增加循环数以补偿效率损失。优化后的PCR体系可在最短循环数内获得理想产物量。

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