wb跑电泳跑到什么位置合适

时间:09-18人气:13作者:唐尸三摆手

DNA片段在琼脂糖凝胶电泳中的迁移距离与片段大小直接相关。1000bp的片段在1%琼脂糖凝胶中通常移动约5-8厘米,而500bp的片段则移动约8-12厘米。200bp片段会移动12-15厘米,100bp片段则移动15-18厘米。DNA上样量控制在20-50纳克最为理想,过多会导致条带模糊,过少则难以观察。电泳时间根据凝胶浓度调整,1%凝胶通常需要30-45分钟完成分离。

溴化乙锭染色后,DNA条带应在凝胶中部位置清晰可见,太靠近点样孔表明片段过大,太靠近底部则说明片段过小。标准DNA ladder应呈现明显的阶梯状条带,每条带间隔清晰。电泳缓冲液液面需完全覆盖凝胶,电压设置在80-120伏之间较为合适。凝胶厚度控制在3-5毫米,过厚会导致条带扩散,过薄则易破裂。电泳结束后立即观察拍照,避免DNA条带扩散变形。

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