时间:09-15人气:25作者:力戰天下
SDS是电泳配方中的十二烷基硫酸钠,一种阴离子表面活性剂。它蛋白质带上负电荷,使分子按大小分离。实验室常用浓度0.1%到0.5%,pH值8.3的Tris-甘氨酸缓冲液系统。SDS破坏蛋白质非共价键,保持线性构象。聚丙烯酰胺凝胶浓度8%到15%根据目标分子量选择,SDS与蛋白质比例约1.4:1(w/w)。配方中还包括TEMED和过硫酸铵引发聚合反应。
SDS在电泳中维持蛋白质变性状态,防止聚集。配方中SDS浓度直接影响迁移率,过高会导致条带扩散。标准Laemmli系统包含4%浓缩胶和10%分离胶,SDS终浓度约0.1%。样品需要100℃加热5分钟确保完全变性。SDS-PRESIEF技术利用SDS浓度梯度实现更精细分离。缓冲液pH值精确控制对分辨率至关重要,任何偏差都会影响结果重现性。
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