时间:09-15人气:12作者:小鸟叫喳喳
TBST缓冲液是实验室常用的洗涤液,由Tris-HCl、NaCl和吐温-20组成。pH值通常维持在7.4-7.6之间,浓度约为20毫摩尔Tris、150毫摩尔NaCl和0.1%吐温-20。这种缓冲液在免疫印迹和ELISA实验中广泛应用,能有效去除非特异性结合物质,降低背景噪音。吐温-20作为表面活性剂,帮助溶解脂质分子,减少抗体与膜的非特异性结合。实验室配制时需注意使用去离子水,确保pH值精确,过滤后4°C保存可维持稳定性1-2周。
TBST缓冲液在蛋白质研究领域扮演重要角色,特别是在Western blot实验中。每次洗涤步骤使用约10-15毫升TBST,室温下摇动孵育5-10分钟,重复3-5次效果最佳。吐温-20浓度过高(超过0.5%)会导致蛋白质从膜上脱落,而浓度过低则洗涤效果不佳。不同实验体系需要调整配方,如高盐TBST(增加NaCl至500毫摩尔)可增强洗涤能力。TBST缓冲液的成本低廉,配制简单,已成为生物实验室的标准试剂之一。
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