时间:09-17人气:10作者:禁止丶聊天
新的色谱柱确实需要老化处理。新柱子首次使用前,必须用流动相充分平衡,这个过程称为老化。老化时间根据柱子类型而定,一般需要30分钟到2小时。未老化的柱子会导致基线不稳,保留时间重现性差。C18柱老化时流速设为0.2-0.5ml/min,硅胶柱则需0.5-1.0ml/min。老化不足的柱子分离效果差,峰形拖尾严重。正确的老化能延长柱寿命,提高分析结果的可靠性。实验室数据显示,充分老化的柱子可多使用100-200次样品分析。
色谱柱老化还能去除生产过程中残留的硅胶碎屑和杂质。新柱子内部填料表面存在活性位点,老化过程能让这些位点与流动相充分结合。实际操作中,HPLC柱老化需要监测基线噪声,直到稳定在±0.001AU以下。离子交换柱老化时间更长,往往需要4-6小时。老化过程中流动相比例应与最终分析方法一致。老化不充分的柱子会导致样品回收率降低15-25%,严重影响定量分析结果。
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