时间:09-15人气:15作者:烽火烟云
PCR通过温度循环实现DNA片段的指数级扩增。这个过程包括高温变性(约95℃)使双链DNA分开,低温退火(50-65℃)让引物结合到目标序列,中温延伸(72℃)让DNA聚合酶合成新链。每个循环产生的DNA都成为下一轮的模板,经过30-35个循环,目标片段数量可增加数十亿倍。整个过程全自动完成,只需几微升反应体系和2-3小时时间。
PCR扩增的特异性由引物决定。引物是人工合成的短链DNA,长度约18-30个碱基,精确互补于目标序列的两端。只有当引物正确结合时,DNA聚合酶才开始合成新链。通过调整引物设计和退火温度,PCR可以区分单个碱基差异,扩增特定基因片段。这种方法已广泛应用于基因检测、病原体鉴定和法医鉴定等领域,成为现代分子生物学的基础技术。
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