时间:09-17人气:10作者:狂凌辕
PCR技术的引物方向是相对且互补的。一条引物设计为与模板链的3'端结合,另一条则与互补链的3'端结合。两条引物分别朝向对方延伸,这样DNA聚合酶才能以模板链为起点合成新链。引物的5'到3'方向决定了DNA合成的方向,这个过程需要2-4种不同的引物组合来完成。
PCR引物的设计遵循严格的碱基配对规则。引物长度一般在18-25个碱基之间,Tm值接近60°C。引物3'端必须稳定,确保有效延伸。引物间不应形成二聚体,避免自身折叠。GC含量保持在40-60%之间,确保引物结合特异性。正确的引物方向设计能确保PCR反应高效、特异地扩增目标DNA片段。
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