pcr产物的电泳检测

PCR产物电泳检测是验证扩增效果的关键步骤。琼脂糖凝胶浓度为0.8%-2.0%，根据片段大小选择合适浓度。DNA染料如EB或SYBR Green使带型可视化。电泳缓冲液常用TAE或TBE，电压设置在80-120伏特之间，运行时间30-60分钟。凝胶成像系统可清晰显示条带位置和亮度，判断扩增是否成功。条带单一明亮表明特异性扩增，多条带或弥散带提示非特异性反应或降解。

PCR产物电泳还能提供片段大小信息。通过与DNA ladder并行电泳，可估算产物长度。100-1000bp范围的片段分辨率最佳，小片段需高浓度凝胶，大片段需低浓度凝胶。电泳后条带亮度与DNA量成正比，半定量分析实验结果。凝胶浓度、电压和运行时间需优化，避免条带拖尾或变形。电泳检测快速简便，2小时内完成从制胶到成像的全过程，是分子生物学实验室的常规操作。