pcr子链的延伸方向

PCR子链延伸方向总是从5'端向3'端进行。DNA聚合酶只能添加核苷酸到新生链的3'末端，这个过程需要引物提供游离的3'-OH基团。反应体系中添加的四种脱氧核苷三磷酸(dNTPs)按特定顺序连接，形成磷酸二酯键。延伸速度受温度影响，一般在72℃时达到最佳效率。每条新合成的DNA链都遵循这个方向性规则，确保复制的准确性。

延伸方向决定了PCR产物的结构特征。引物设计必须考虑这个方向性，确保引物3'端与模板链互补。引物长度一般在18-25个核苷酸之间，过短会导致非特异性结合。DNA聚合酶沿着模板链移动时，解开双螺旋结构，同时合成新链。这个过程需要镁离子作为辅助因子，浓度通常在1.5-3.0毫摩尔之间。延伸时间的长短直接影响PCR产物的长度，一般每延伸1000个碱基需要1分钟时间。