电泳跑到什么位置结束

时间:09-17人气:21作者:麦田的哭泣

电泳实验的结束位置取决于凝胶浓度和样品分子量。12%的聚丙烯酰胺凝胶适合分离小分子蛋白质(10-100kDa),条带通常跑至距胶底1厘米处停止。琼脂糖凝胶(0.8-1.5%)用于DNA分离,3000bp的DNA片段在100伏电压下电泳45分钟,迁移距离约为胶长的三分之二。蛋白质电泳中,分子量标记物的条带位置是判断实验终止的关键点,当溴酚蓝指示剂接近胶底时,多数蛋白质已完成分离。

电泳结束位置受缓冲液pH值影响显著。Tris-甘氨酸缓冲液(pH 8.3)适合蛋白质分离,而TAE缓冲液(pH 8.0)则用于DNA电泳。电压设置同样决定终点时间,100伏电压下小型胶(10×10cm)电泳需要45-60分钟,而大型胶(20×20cm)需要延长至90分钟。预染分子量标记物能直观显示电泳进程,当蓝色条带接近凝胶末端时,表明多数目标DNA片段已充分分离,可以终止实验。

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