电泳缓冲液一般加到什么位置

时间:09-15人气:24作者:新欢胜旧爱

电泳缓冲液通常加到电泳槽中,刚好没过凝胶表面约0.5-1厘米的位置。这个高度能让电流均匀通过凝胶,同时避免气泡产生。缓冲液太少会导致电泳效率低下,太多则可能溢出污染设备。实际操作中,缓冲液液面应略高于凝胶上样孔,确保样品能顺利进入分离胶。实验室常用的缓冲系统包括TAE和TBE,添加量需根据电泳槽规格调整,小型槽约200毫升,大型槽可达1000毫升。

电泳缓冲液高度直接影响实验结果。液面过低会造成凝胶局部过热,条带变形;过高则会稀释样品,降低分辨率。标准做法是加入缓冲液后,轻轻晃动电泳槽,确保液面均匀。缓冲液电导率随使用次数增加而下降,一般重复使用3-5次后需更换。某些特殊实验,如DNA测序,对缓冲液高度要求更严格,必须精确控制在凝胶上方3毫米处,以保证电场稳定性和分离效果。

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