转染质粒时培养基有没有血清

时间:09-15人气:11作者:袖手旁观

转染质粒时培养基需要添加血清。血清提供细胞生长必需的生长因子、激素和附着因子,帮助细胞在转染过程中保持健康状态。常见做法是使用含10%胎牛血清的DMEM培养基进行质粒转染。血清浓度可根据细胞类型调整,HEK293细胞适合5-10%血清,而CHO细胞则需要10%血清。无血清培养基虽然存在,但转染效率往往较低,细胞存活率也会下降。实验室数据显示,添加血清的转染效率比无血清条件高出3-5倍。

培养基血清含量直接影响转染后蛋白表达水平。高血清浓度(15%)能显著提高某些难转染细胞的效率,如原代神经元细胞。血清中的白蛋白可保护质粒DNA不被核酸酶降解,延长其在细胞外存活时间。实验证明,使用含血清培养基的质粒稳定性比无血清条件提高约2倍。血清还能中和转染试剂的细胞毒性,减少细胞死亡。不同血清批次效果存在差异,建议预实验确定最佳浓度,一般在8-12%之间可获得理想结果。

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