色谱柱平衡多久可以用

色谱柱平衡时间根据柱子规格和流动相组成确定。5mm内径 analytical 柱需15-20分钟，10mm preparative 柱需要30-40分钟。反相柱平衡时，流动相比例变化不超过10%可缩短时间。梯度平衡需3-5个梯度循环。新柱首次使用需平衡2小时，旧柱更换流动相后平衡30分钟足够。实际应用中，基线稳定即可认为平衡完成，一般检测器信号波动小于0.0005AU时表示平衡良好。

色谱柱平衡效率受温度影响显著。25°C环境下平衡时间比4°C快30%。流速增加20%可缩短平衡时间，但过高流速会损害柱床。乙腈-水体系平衡比甲醇-水体系快15%。现代HPLC系统配备在线脱气装置，可减少气泡干扰，平衡时间缩短25%。使用预混合流动相而非现场混合，能将平衡时间减少一半。实际操作中，基线平稳且保留时间重现性良好时，表明柱子已平衡完成。