时间:09-18人气:27作者:潇洒大哥
紫外吸光度在0.2至1.0范围内测量结果最为准确。这个区间内仪器检测误差最小,信号稳定可靠。实验室数据显示,吸光度值低于0.2时,检测信号弱,误差可高达15%;高于1.0时,溶液浓度过高,导致透光率下降,误差同样增大。标准曲线法测定时,0.5左右的吸光度值重现性最佳,相对误差控制在5以内。高效液相色谱检测器也遵循这一规律,吸光度0.3-0.8时色谱峰形尖锐,基线平稳。
紫外分光光度计在200-400nm波长范围内,0.4-0.8吸光度值信噪比最高。蛋白质定量实验中,595nm波长下0.6吸光度值比色结果与实际浓度相关性最强。DNA浓度测定时,260nm处0.5吸光度值对应50μg/mL纯DNA溶液,误差最小。酶标仪检测96孔板时,OD值0.2-0.7范围内数据离散度最低,批间差异小于8。这一规律适用于大多数紫外可见分光光度分析场景。
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